RESUMO
Chronic hepatitis C viral infection modulates complement. The aim of this study was to determine whether complement analysis predicts liver inflammation and fibrosis in patients with chronic hepatitis C. 50 chronic hepatitis C patients who underwent a liver biopsy were compared to 50 healthy controls and 35 patients with various liver diseases. Total plasma complement activity (CH50) in plasma was diminished in hepatitis C patients suggesting complement activation. This decrease correlated with increased necrosis (r = -0.24, p < 0.05), and patients with levels below the normal range had a higher METAVIR activity score reflecting enhanced inflammation. SC5b-9, a marker of complement activation, correlated with inflammation (r = 0.40, p < 0.05), activity (r = 0.42, p < 0.05), and fibrosis scores (r = 0.49, p < 0.05). Finally, the prevalence of C1q auto-antibodies was higher in hepatitis C patients, and their presence was associated with increased inflammation and seemed to affect fibrosis. We conclude that complement-induced liver inflammation contributes to fibrosis in patients with chronic hepatitis C.
Assuntos
Ativação do Complemento/imunologia , Hepatite C Crônica/imunologia , Hepatite C Crônica/patologia , Cirrose Hepática/imunologia , Cirrose Hepática/patologia , Necrose , Adulto , Autoanticorpos/imunologia , Biomarcadores/metabolismo , Complemento C1q/imunologia , Proteínas do Sistema Complemento/imunologia , Proteínas do Sistema Complemento/metabolismo , Feminino , Fibronectinas/metabolismo , Hepatite C Crônica/complicações , Hepatite C Crônica/diagnóstico , Humanos , Fígado/imunologia , Fígado/metabolismo , Fígado/patologia , Cirrose Hepática/complicações , Cirrose Hepática/diagnóstico , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , PrognósticoRESUMO
The efficacy of cancer-immunotherapy with complement-activating monoclonal antibodies is limited by over-expression of one or more membrane-bound complement regulatory proteins (mCRPs: CD46, CD55, CD59) on the surface of neoplastic cells. In this study we designed small interfering RNAs (siRNAs) for posttranscriptional gene knock down of CD46, CD55 and CD59 aiming at to sensitize tumor cells to complement attack and thereby to better exploit complement for tumor cell destruction. Tumor cell lines of different origin, such as Du145 (prostate), BT474 (breast) and K562 (erythroleukemia) were selected for the study. FACS-analysis demonstrated that siRNA anti-CD46(301) reduced CD46 protein expression up to 80%, siRNA anti-CD55(255) diminished CD55 protein expression up to 49%, and CD59 protein expression was inhibited up to 82% by siRNA anti-CD59(1339). Time course experiments revealed a long-lasting silencing effect with >50% complement regulator inhibition up to day 13. Upon mCRP knock down, complement-dependent cytotoxicity (CDC) was augmented by 20-30% for CD46, by up to 24% for CD55 and by up to 55% for CD59. The combined inhibition of all three inhibitors further enhanced CDC by up to 66%. Dependent on the cell line, CD46 and CD55 downregulation increased significantly C3 ospsonization, which is known to support cell-mediated defense mechanisms. mCRP blocking antibodies were only partly able to further augment the tumor cells' susceptibility to complement lysis. Thus, siRNA-induced inhibition of complement regulator expression clearly sensitizes malignant cells to complement attack and, if specifically targeted to the tumor, appears suited as adjuvant to improve antibody-based cancer immunotherapy.
Assuntos
Antígenos CD55/metabolismo , Antígenos CD59/metabolismo , Ativação do Complemento/genética , Proteína Cofatora de Membrana/metabolismo , Neoplasias/genética , Neoplasias/imunologia , RNA Interferente Pequeno/genética , Antígenos CD55/química , Antígenos CD55/genética , Antígenos CD59/química , Antígenos CD59/genética , Ativação do Complemento/imunologia , Citometria de Fluxo , Humanos , Proteína Cofatora de Membrana/antagonistas & inibidores , Proteína Cofatora de Membrana/genética , Neoplasias/patologia , RNA Mensageiro/genética , RNA Neoplásico/genética , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Células Tumorais CultivadasRESUMO
Objetivo: A gp120 da superfície do HIV é extensivamente glicosilada e representa excelente alvo de ligação para a MBL. Este estudo teve por objetivo avaliar os níveis séricos de MBL e sua atividade funcional na transmissão materno-fetal do HIV correlacionando-os com as características clínico-laboratoriais da infecção. Métodos: Amostras de soro e plasma de 79 crianças HIV soropositivas e negativas, e suas mães soropositivas, foram coletadas. Os pacientes foram divididos em dois grupos: crianças HIV soropositivas (C+) e suas mães (MT) (n=18) e crianças HIV soronegativas (C-) e suas mães (MNT) (n=61). Os níveis séricos e atividade funcional da MBL foram verificados por ELISA, detectados por anticorpos monoclonais anti-MBL e pelo consumo de C4, respectivamente. Resultados: A avaliação laboratorial não verificou diferença estatisticamente significante dos níveis séricos e atividade funcional da MBL entre os grupos. Verificou-se correlação entre os níveis séricos e funcionais de MBL. A distribuição de carga viral não diferiu significativamente entre os grupos MNT, MT e C+. Os níveis séricos de MBL também não diferiram entre os pacientes que receberam terapia anti-retroviral, quando comparados aos que não foram tratados. Conclusão: Os dados obtidos mostraram ausência de correlação entre os níveis séricos de MBL, e sua atividade funcional, na transmissão materno-fetal do HIV.
